地蓝消炎口服液,。
拜阿司匹林。乙醚。甲醇。1,2-13C2-肉豆蔻酸、吡啶、N,O-双(三甲基硅基)三氟乙酰胺(BSTFA)、甲氧基胺盐酸盐。正己烷。
氯化钠。标准品:丙酮酸、乳酸、葡萄糖、3-磷酸甘油酸、琥珀酸苹果酸、富马酸、柠檬酸和α-酮戊二酸。”
“方法那就更加简单了。”
“首先,动物实验及样本收集36只ICR小鼠,体质量(20±5)g,雌雄各半,按体质量随机分为6组,每组6只。
也就是对照组、模型组、拜阿司匹林组(200毫克千克)、蒲地蓝消炎口服液低剂量组(1.3毫升千克)、蒲地蓝消炎口服液中剂量组(3.9毫升千克)、蒲地蓝消炎口服液高剂量组(11.7毫升千克)。
拜阿司匹林组和蒲地蓝消炎口服液各剂量组给予相应剂量药物,每日1次,连续5d,空白组和模型组灌胃等体积的生理盐水。
末次给药1小时后,除空白组外,其余各组构建急性肺炎模型。
即使用异氟烷麻醉小鼠后,用脂多糖(2毫克千克)给小鼠滴鼻造模,空白组滴入相同体积生理盐水,造模12小时后进行取材。
各组小鼠摘眼球取血,解剖并取左肺中叶用百分之10甲醛溶液固定,石蜡包埋后进行小时E染色,分装部分血清用于检测IL-10、TNF-α和NF-κB的含量,剩余血清置于-80摄氏度保存,进行后续代谢组学检测。”
钟医喘了一口气,继续说道。
“其次,是溶液的配制。
精密称取丙酮酸、乳酸、琥珀酸、富马酸、苹果酸、α-酮戊二酸、磷酸烯醇式丙酮酸、顺式乌头酸、3-磷酸甘油酸、柠檬酸、异柠檬酸和葡萄糖对照品,溶解成1毫克毫升的对照品储备液。
精密量取上述对照品储备液分别稀释成4、120、16、0.1、0.5、1、0.02、0.01、0.04、2.5、0.16、240微克毫升的对照品溶液,4摄氏度保存。
精密称取1,肉豆蔻酸适量置于10毫升容量瓶中,加甲醇稀释溶解,配制成1毫克毫升的内标储备液,4摄氏度保存。
吸取内标储备液适量,加入甲醇稀释成浓度为5微克毫升的内标工作液。
然后是样本前处理及衍生化反应。
取50微升血清,加入200微升预冷的含1,2-13C2-肉豆蔻酸(5微克毫升)的甲醇溶液,涡
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